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aflp检测服务

aflp是基于pcr技术扩增基因组dna限制性片段,基因组dna先用限制性内切酶切割,然后将双链接头连接到dna片段的末端,接头序列和相邻的限制性位点序列,作为引物结合位点。限制性片段用二种酶切割产生,一种是罕见切割酶,一种是常用切割酶。它结合了rflp和pcr技术特点,具有rflp技术的可靠性和pcr技术的高效性。由于aflp扩增可使某一品种出现特定的dna谱带,而在另一品种中可能无此谱带产生,因此,这种通过引物诱导及dna扩增后得到的dna多态性可做为一种分子标记。

操作流程

aflp反应程序主要包括模板dna制备,酶切片段扩增及凝胶电泳分析这3个基本步骤。各步骤具体的过程有:
1.首先要制备高分子量(hmw)基因组dna,选择6个碱基识别位点的限制性内切酶(通常是ecori或psti或saci)。
2.酶切后的限制性片段在t4连接酶的作用下与特定的接头相连接,形成带有接头的特异性片段。
3.dna片段的预扩增。
4.在taq聚合酶的作用下,完成aflp的选择性扩增。
5.带荧光标记的pcr产物进行测序仪上机检测。
6.多态性比较分析。


aflp结果示例


送样要求

细胞(≥106)、组织(≥300mg)、血液(≥1ml)、基因组dna(体积≥20μl,浓度≥ 50 ng/μl)。

提供结果

原始数据、引物序列、实验报告、pdf格式毛细管电泳图谱和excel格式片段长度

成功案例

某单位客户进行了微卫星的检测后发现标记不足,加做了aflp标记,利用分型图谱最终构建了比较成功的遗传连锁图谱。

检测项目

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